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天津本生詳解甘油三酯(TG)檢測試劑盒

發布時間:2022-11-22    點擊次數:46

甘油三酯(TG)檢測試劑盒 

PS1087 甘油三酯(TG)檢測試劑盒 GPO-PAD單試劑微板法 (psaitong)保存條件:-20℃ 避光 6個月
產品簡介

甘油三酯(Triglyceride,TG)又稱三酰甘油,是3分子長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是人體內含量最多的脂類,大部分組織均可以利用甘油三酯分解產物供給能量,同時肝臟、脂肪等組織還可以進行甘油三酯的合成,用酶學方法測定 TG 是生化檢測中的常用方法, 其特點是:1、靈敏度、準確度、精密度均高;2、使用溫和的反應條件;3、操作簡便;4、適用于自動分析儀。
本公司甘油三脂(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP 單試劑微板法)又稱磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-過氧化物酶偶聯法等,其原理是甘油三脂被 LPL 水解為甘油和脂肪酸,后者經甘油激酶和 ATP 磷酸化,G-3-P 被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并產生過氧化氫,再經過氧化物酶(POD)催化,使 4-氨基安替比林與酚(三者合稱 PAP)反應,生成紅色benhun醌亞胺(Trinder 反應),酶標儀在 500~520nm 處進行比色測定,用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織等樣本中的甘油三脂含量定量測定。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

 組分:

名稱規格儲存
試劑(A): GPO-PAP工作液Good's Buffer 
 
30mL
 
 
-20℃ 避光
LPL、GK、GPO
過氧化物酶(POD)
4-氨基安替比林
對氯酚
試劑(B): Glycerol 標準(1.7mmol/L)1mL4℃ 避光
試劑(C): ddH2O1mLRT

 
自備材料:

1、生理鹽水或PBS。
2、96 孔板或離心管、小試管。
3、水浴鍋或恒溫箱。
4、酶標儀或分光光度計。
5、全自動或半自動生化分析儀。

 
操作步驟(僅供參考)

一、樣本處理
1、血清、血漿、腦脊液樣本:從待測樣本中分離出的血清或血漿不應有溶血,直接檢測,如超過線性范圍,用生理鹽水稀釋后檢測。
2、細胞樣本
a:取適量的細胞(一般推薦>106以上),1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
b:.用 PBS 或生理鹽水清洗 1-2 次,1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
c:加入200-300μl 的PBS或生理鹽水勻漿,冰浴條件下超聲破碎細胞,功率300W,每次3-5s,間隔30s,重復3-5次;亦可手動勻漿,制備好的勻漿液不可離心;亦可用1-2% Triton X-100 冰浴 30-60min,制備好的裂解液不可離心。
3、組織樣本:準確稱取適量組織樣本,按質量(g):生理鹽水或PBS(mL)=1:9的比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴條件下手動或機械勻漿,2500-3000g 離心10min,取上清待用。
二、酶標儀TG測定操作:
1:按下表依次加入試劑:
加入物(μL)空白孔標準孔待測孔
ddH2O3--
Glycerol 標準(1.7mmol/L)-3-
待測樣本--3
GPO-PAP 工作液300300300
2:充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
3:酶標儀測定 500-520nm 吸光度,以空白孔調零,讀取標準孔和各待測孔的吸光度。
三、分光光度計(1ml 比色杯)、半自動生化分析儀 TG 測定操作:
1、按下表依次加入試劑:
加入物(mL)空白管標準管待測管
ddH2O0.01--
Glycerol 標準(1.7mmol/L)-0.01-
待測樣本--0.01
GPO-PAP 工作液111
2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度計測定500-520nm吸光度,空白管調零,讀取標準管和各待測管的吸光度。
四、普通分光光度計(2mL比色杯)TG 測定操作:
1、按下表依次加入試劑:
加入物(mL)空白管標準管待測管
ddH2O0.02--
Glycerol 標準(1.7mmol/L)-0.02-
待測樣本--0.02
GPO-PAP 工作液222
2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度計測定500-520nm吸光度,空白管調零,讀取標準管和各待測管的吸光度。
五、全自動生化分析儀 TG 測定操作:
1、按下表依次加入試劑:
加入物((μL)空白管標準管待測管
ddH2O3--
Glycerol 標準(1.7mmol/L)-3-
待測樣本--3
GPO-PAP 工作液300300300
2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
3、全自動生化分析儀測定 500-520nm 波長處吸光度,以空白管調零,讀取標準管和各待測管的吸光度。

 
機器參數:

主波長/次波長500/600nm
反應類型終點法
反應方向升反應(+)

 
計算公式:

血清、血漿等液體樣本(空白調零):
TG(mmol/L)={(待測管吸光度-空白吸光度)/(標準管吸光度-空白吸光度)}×1.7mmol/L
血清、血漿等液體樣本(全自動生化分析儀):
TGmmol/L)=(待測管吸光度/(標準管吸光度)×1.7mmol/L
細胞、組織等樣本(空白調零):
TG(mmol/L)={ ( 待 測 管 吸 光 度 - 空 白 吸 光 度 )/( 標 準 管 吸 光 度 -空 白 吸 光 度 ) }×1.7mmol/L÷待測樣本濃度(mg/mL)
細胞、組織等樣本(全自動生化分析儀):
TG(mmol/L)=(待測管吸光度/(標準管吸光度)×1.7mmol/L÷待測樣本濃度(mg/mL)

 
參考區間:

健康成年人:
理想范圍:<1.7mmol/L(<150mg/dl)
邊緣升高:<1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl)
升高:<2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl)
很高:≥565mmol/L(≥500mg/dl)

 
性能指標:

外觀無色至淡黃色澄清液體
線性范圍0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl),R2>0.98
靈敏度檢測下限 0.05mmol/L(4mg/dl)
變異系數批內<5%,批間<8%,總誤差<10%
空白吸光值<0.2(1cm 光徑)
干擾因素膽紅素<205μmol/L;血紅蛋白<6g/L;EDTA、肝素抗凝時,對結果無明顯影響。
穩定性密閉,6個月

 
注意事項:

1、上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。
2、本法可直接用于檢測腦脊液中的TG含量,但不能直接檢測尿液中的TG含量,因為未經處理的尿液中含有還原性物質,影響過氧化物酶反應。
3、待測樣本如不能及時測定,應置于2-8℃保存,3天內穩定。
4、本法線性范圍可達9.0mmol/L,如果樣本TG濃度過高,結果可能呈假性降低,應用生理鹽水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數。

 
 

有效期:-20℃ 避光, 6個月有效。

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